جداسازی، شناسایی و تعیین بیوتیپ یرسینیا انتروکولیتیکای بیماری زا از شیرهای پاستوریزه

به منظور بررسی وجود سویه­های بیماری­زای یرسینیا انتروکولیتیکا در شیر پاستوریزه، طی سال­ 1390 تعداد 242 نمونه شیر پاستوریزه عرضه شده در تبریز جمع­آوری گردید. نمونه­ها در محیط psbb غنی­سازی شد و از ژن­های ail و  virfبه عنوان توالی­های هدف برای ردیابی سویه­های بیماری­زای یرسینیا انتروکولیتیکا در نمونه­های غنی­ شده استفاده گردید. از نمونه­های مثبت در آزمایش pcr در محیط cin آگار وmacconkey آگار کشت داده شد و پرگنه­های مشکوک با duplex-pcrتأیید گردید. جهت تعیین بیوتیپ یرسینیا انتروکولیتیکا،جدایه­ باکتری به وسیله آزمون­های بیوشیمیایی مورد ارزیابی قرار گرفت. همچنین شمارش تعداد باکتری­های شاخص بهداشتی و آزمون کیفی فسفاتاز قلیایی (alp) بر روی نمونه­های شیر پاستوریزه انجام یافت. یرسینیا انتروکولیتیکای بیماری­زا در 61/6% (16 نمونه) از نمونه­های شیر پاستوریزه با روش ail-pcr ردیابی گردید. در حالی که 13/4% (10 نمونه) از نمونه­ها با روش virf-pcrمثبت تشخیص داده شد. از بین نمونه­های مثبت در آزمایش pcr، فقط 41/0% (1 نمونه) به وسیله کشت جداسازی و با duplex-pcr تأیید گردید. بر اساس آزمایش­های بیوشیمیایی، جدایه یرسینیا انتروکولیتیکا ازنوع بیوتیپ 4 تعیین گردید. طبق نتایج مطالعه، 57/11% (28 نمونه) از نمونه­های شیر پاستوریزه alp مثبت بودند و تعداد باکتری­های شاخص بهداشتی در این نمونه­ها در قیاس با نمونه­های alp منفی تفاوت معنی­دار (01/0>p) نشان داد. با توجه به حساسیت زیاد یرسینیا انتروکولیتیکا نسبت به حرارت پاستوریزاسیون، لذا آلودگی ثانویه می­تواند دلیل اصلی حضور یرسینیا انتروکولیتیکای زنده در شیر پاستوریزه باشد.